Western blot Metody detekce

Jakpočet případy HIV a AIDS vzrostl na celém světě ,je třeba pro přesné testování na HIV se stala zásadní . Nyní po pozitivních testů ELISA HIV , lékaři používají Western test blot potvrdit pozitivní infekce HIV . Lékaři diagnostice lymeské boreliózy pomocí testů Western blot stejně . Test využívá složité metody detekce : zdravotníci musí přenášet vzorky krve z gelu na membránu k usnadnění procesu detekce . Chcete-li skutečně zjistit protilátky v membráně , pracovníci používají specifické enzymy , substráty a /nebo flurophores . AP Enzyme

alkalická fosfatáza ( AP ), představuje jednu z hlavních enzymů při testování Western blot . AP má lineární reakční dobu , což mu dává detekční výhodu nad jinými enzymy . Čím více časureakce AP musí dojít ,přesnější test . Nicméně ,delší období můžete vyzvednout další chemické sloučeniny a " pozadí " šum , který může zkreslit výsledky testu .
HRP enzymů

Zdravotníci považují křen peroxidázou ( HRP ), nadřazený AP , kvůli HRP v menší velikosti , vysokou mírou aktivity , kompatibilitu s reakční membránou , spolehlivost , nízkou cenu a širokou dostupností .

chromogenní substráty

Lékaři považují chromogenní substráty nejlepší pro prohlížení vnitřní membrány reakce krve a enzymu . Chromogenní substráty nejsou tak citlivé jako jiné substráty, a mají tendenci , že zmizíblot suší . Ale pro rychlé potvrzení vizuální zkoušce , chromogenní substráty provést efektivní výběr .
Chemiluminiscenční Blotting Substráty

chemiluminiscenční blotting substráty vyžadují neustálé reakce pro úspěšnou zkoušku . Je-lienzym přestane činnost nebosubstrát je vyčerpán ,výsledky vyšetření se ztratil . Nicméně, v optimálním testu ,výsledky vyšetření k dispozici v jedné až 24 hodin . Zdravotníci používat digitální zobrazovací zařízení nebo X - paprsky , aby skutečně vidět výsledek testu , protožepouhým okem nelze detekovat .
Flurophores

Pokud zdravotníci netestují s enzymy a jejich substráty , pak využít flurophore konjugované protilátky . Test flurophore vyžaduje méně kroků , ale potřebuje speciální vybavení . Test vyžaduje zdroj excitačního světla , což způsobí, že správné reakce na membráně . Flurophores aosvětlovací zařízení jsou drahé , ale zdravotníci mají prospěch z použití více flurophores ve stejném experimentu .