Detekuje ELISA přítomnost HIV?
Zde je přehled toho, jak se ELISA používá k testování HIV:
Antigenní potah:Mikrotitrační destičky jsou potaženy antigeny odvozenými z HIV proteinů, jako je obalový glykoprotein (gp120, gp41), nebo jiné virové složky.
Přidání vzorku:Zředěné vzorky testovacího séra nebo plazmy se přidají do jamek destičky potažené antigenem.
Reakce protilátka-antigen:Pokud jsou ve vzorku přítomny protilátky HIV, navážou se na odpovídající antigeny potažené na destičce. To vytváří komplex antigen-protilátka.
Krok promývání:Nenavázané látky, jako jsou přebytečné složky vzorku, jsou vymyty.
Sekundární protilátka vázaná na enzym:Je přidána sekundární protilátka vázaná na enzym specifická pro zachycené protilátky HIV. Tato protilátka je konjugována s enzymem, jako je křenová peroxidáza (HRP).
Přidání substrátu:Přidá se substrát specifický pro enzym. V přítomnosti HRP dochází ke kolorimetrické nebo fluorescenční reakci.
Vývoj barvy:Po specifické inkubační době se substrát přemění na barevný nebo fluorescenční produkt, který lze detekovat a kvantifikovat pomocí čtečky ELISA.
Interpretace výsledků:Měří se optická hustota (OD) nebo intenzita fluorescence, aby se vyhodnotilo množství zachycených protilátek HIV ve vzorku. Pozitivní výsledek ukazuje na přítomnost protilátek HIV, což naznačuje potenciální infekci HIV. Hraniční hodnota je definována pro rozlišení mezi pozitivními a negativními výsledky.
ELISA je široce používána při screeningu a diagnostice HIV, protože poskytuje relativně jednoduchou, přesnou a citlivou metodu pro detekci protilátek proti HIV. Je však třeba poznamenat, že výsledky ELISA mohou někdy vyžadovat další potvrzení dalšími testy, jako je Western blot nebo testování virové zátěže, aby byla zajištěna přesnost diagnózy.

