Popis tuberculosis barvení podle Grama
Tuberkulóza jeinfekční onemocnění způsobené Mycobacterium tuberculosis . Tuberkulóza jeonemocnění dýchacích cest charakterizované útvary tubercules , nekrózy , abscesy , fibrózy a kalcifikace v plicích . To může také infikovat ledviny , lymfatické uzliny , kosti , klouby a skin.Primary Laboratorní diagnostika Mycobacterium tuberculosis zahrnuje barvení pro vizualizaci bakterií pod mikroskopem . Vzor volby je sputum nebo bronchoalveolární laváž identifikovat infekce dýchacích cest nebo aktuální vzorek tkáně . Fyziologie
Mycobacterium tuberculosis jetyč ve tvaru ( bacily ) , non - pohyblivé , non - Spöring , obligátně aerobní . Měří 0.4x3 mikrometrů na délku . Mycobacterium tuberculosis prochází binární štěpení ( dělení pohlavní buňky ) každých 15 až 24 hodin, což je ve srovnání s jinými bakteriemi pomalu . Z tohoto důvodu můžeMycobacterium trvat až devět týdnů, se objeví na kultivačním médiu .
Mycobacterium tuberculosis je citlivý na UV záření a tepla ( např. pasterizace ), ale odolná vůči chemických dezinfekčních přípravků .
gram Stain
Mycobacterium tuberculosis nemůže být skutečně klasifikována jako gram pozitivní a gram- negativní . Klasifikace gram je založen na množství peptidoglykanu v buněčné stěně je baktérie . Gram-pozitivní bakterie má hustou peptidoglykanové vrstvy ( asi 90 procent ) , zatímcogram negativní bakterie má tenkou vrstvu peptidoglykanu ( 5-20 procent ) . Na gram barviva pronikají buněčnou stěnu a vázat se chemických složek v buněčné stěně . Z barevného bakterie se objeví fialové nebo růžové pod mikroskopem . Celým
s Mycobacterium tuberculosis ,buněčná stěna se skládá peptidoglykanu , ale také komplexní lipidy , které inhibují gram pronikání barviva . Buněčná stěna také odolává odbarvování kyselinou nebo alkohol , a protose označují jako mycobacterium " acid- rychle. " Buněčná stěna lipidy jsou kyselina mykolové , kabel faktor a vosk - D . V případě , že se bakterie , které mají být obarveny , bakteriální buňky se zdá slabě gram - pozitivní nebo světle s velmi malou barvou . Celým
Pro vizualizaci bakterie , speciální skvrny , jako je barvení Aumarine nebo Zhiel - Neelson skvrna , musí být provedeny .
Auramin - rhodamine skvrna
Auramin - rhodamine proces používá žlutou fluorescenční barvivo pro vizualizaci Mycobacterium tuberculosis pod fluorescenčním mikroskopem . Manganistan draselný nebo akridinové oranže může být použit jako kontrastním . Podle objektivu , budou bakteriální buňky se objeví zelená .
Auramin - rhodamine skvrna je mnohem citlivější nežZhiel - Neelson a nákladově efektivnější .
Ziehl - Neelson skvrna
Ziehl - Neelson skvrna pochází od vědců Franz Ziehl a Friedrich Neelsen . Používá vyhřívaný Carbol fuschin , vysoké koncentraci kyseliny - alkohol a kontrastním jako malachitové zeleně či methylenové modři . Pod fluorescenčním mikroskopem , se bakteriální buňky se objeví jasně růžovou .
Ziehl - Neelson jezlatý standard pro primární identifikaci Mycobacterium tuberculosis a Mycobacterium leprae .
Agar
Sekundární mikroskopie identifikaci , musí být Mycobacterium tuberculosis pěstovány na speciálních kultury agaru . Lowenstein - Jensen agar má složité organické látky ( např. vejce , brambory ) , soli , glycerol a malachitové zeleně ( inhibuje jiné bakterie ) . Antibiotika mohou být přidány , aby dále bránit kontaminujících bakterií . Vzorek se umístí na tomto agaru a bakterie rostou v tři-devěttýdnů .
Kultura roztok živin, jako je albumin a biotin mohou být použity na podporu růstu i toho nejmenšího množství cílových bakterií . Toto je známé jako Middlebrook 7H9 ( nebo 7H12 ) média .
Kolonie se objeví jako malé , naleštěné , světle hnědé kolonie na obou .
S pokročilou technologií , Mycobacterium tuberculosis mohou nyní být pěstovány za použití automatizované čtenář . Kapalný roztok Middlebrook 7H9 média a fluorescenční indikátor sloučeniny se používají ke sledování růstu a hlásit pozitivní nebo negativní infekce .
