Co NENÍ relevantní pro laboratorní diagnostiku neštovic variola?

Přímý fluorescenční test protilátek (DFA)

DFA barvení klinických vzorků přímo na sklíčko (např. stěry z kožních lézí) se ukázalo jako rychlá, citlivá a specifická metoda, kterou lze provádět v laboratoři BSL-3. DFA byla základem laboratorní diagnostiky neštovic v referenční laboratoři WHO.

Elektronová mikroskopie

EM s negativním kontrastem umožňuje rychlou laboratorní identifikaci virionů neštovic podle jejich charakteristické morfologie, která se liší od vzhledu jiných poxvirů. Částice viru pravých neštovic pozorované pomocí EM v klinických vzorcích kožních lézí jsou typicky kulovité, 250–270 nm v průměru a obsahují typická laterální tělíska „ve tvaru činky“.

Testy amplifikace nukleové kyseliny (NAAT)

Test PCR zaměřený na oblast inkluzního genu typu A (ATI) se ukázal jako velmi citlivý laboratorní test, který umožnil spolehlivou detekci a odlišení neštovic od jiných ortopoxvirů. Primery a sondy vybrané z konzervovaných oblastí genu ATI byly úspěšně testovány pro detekci DNA viru variola v klinických vzorcích neštovic.

Histopatologie

Vyšetření histopatologie kožních lézí pomocí světelného mikroskopu může poskytnout užitečná diagnostická vodítka, pokud existuje vysoký index podezření na neštovice, zejména pokud je tkáň odebírána časně (4–6 dní) ve vývoji lézí. Hlavní rysy histologie neštovicové kožní léze jsou (a) epidermální hyperplazie s balónovitou degenerací, nekrózou a tvorbou mnohojaderných obřích buněk; (b) dermální edém spojený s vaskulitidou a perivaskulárním infiltrátem; a (c) přítomnost intracytoplazmatických inkluzních tělísek v epidermis.