Lentivirus Transfection Protocol

američtí a evropští vědci používají lentiviry v klinické studii průkopnickém zaměřené na léčení adrenoleukodystrofie ( ALD ) ,fatální onemocnění mozku u mladých chlapců , které je způsobeno mutovaného ALD genu . Lentivirus vydal správnou verzi ALD genu dvou mladých pacientů a v roce 2009 , vědci oznámili, že se zastavil progresi onemocnění . Lentiviruses

Lentiviruses jsou retroviry , protože jejich genetická informace je obsažena v RNA spíše než DNA . Jsou infikovat lidské buňky aspeciální enzym přeměňuje jejich RNA do DNA , která se integruje do buněčné DNA . Buňky replikovat těchto genů , které tvoří další viry , které infikují další buňky .
Změny

Vědci upravili lentiviry . Místo toho, aby dodávání genů virů do buňky ,modifikované lentivirus přináší terapeutický gen , jako je ALD . Jsou umístěny geny pro virových strukturních proteinů v plasmidu , které jsou malé kousky DNA . Samostatný plasmid obsahuje ALD genu .

Transfekční

Vědci vyrábět modifikované lentiviry transfekci . Mixují plazmidy se solí nebo lipidy , které umožňují plasmidů do buněk , kde jsou replikovány . Buňky produkují virové strukturální proteiny, které samostatně shromažďují do virových částic , z nichž každá obsahuje kus RNA s ALD genu. Tyto modifikované částice opuštění buňky do růstového média , kde jsou shromažďovány pro použití ve studiích genové terapie .
Používá

viry jsoupopulární nástroj pro modifikaci buněk pro výzkum a průmyslové účely , kromě genové terapii . Například , buňky mohou být provedeny , aby vyjádřil inzulínu pro farmaceutickou výrobu nebo zelený fluorescenční protein pro sledování buněk v migračních studiích .