O Magnetická extrakce DNA
když magnetické extrakce není vždymetodu použít pro situaci , má několik výrazných výhod , díky nimž je situačně účinné jako extrakční metody než starší metody , jako jsou fenolové extrakce , která vyžaduje opakované odstředivé zpracování po každém chemickém aplikaci amnohem více investovali čas . Magnetická extrakce je rychlejší, protože se opírá o vazbu specifických funkčních skupin na povrchu potažených magnetických kuliček a mohou být odděleny použitím jednoduchého magnetu ( které mohou být v kombinaci s použitím odstředivky , jak je požadováno ) . Magnetické korálky ?
Specifické sady magnetických kuliček se běžně používají pro extrakci DNA . Protože každý systém , který zahrnuje mechanické procesor ušetřit práci , přichází s vlastní značkou , měli byste používat pouze korálky určené pro daný systém . Velikost korálku a nátěry může změnit výsledky , pokud jsou použity v různých zařízeních , která snižuje důvěryhodnost vašeho výzkumu . Dokonce i speciálně vyrobené alternativy může zvýšit experimentální chybu a měly by být zveřejněny při vykazování výsledků , je-liodsavač neučinil pracovat s konkrétními korálky .
Měl jsem " kombinovat " systémy ve výzkumu ?
systémy, které používají různé kuličky mohou mít vliv na výsledky . Henderson et al . dospěl k závěru , že z devíti korálkových testovaných typů , Dynabeads ® DNA DIRECT ™ podle Invitrogen ™ lze pouze vyzvednout DNA, která má geometricky zkroucený namáhání . To znamená, že zmagnetizované kuličky zachovány pouze větší kousky DNA . Dále bylo uvedeno, žeDNA měl být volně plovoucí ( v roztoku ) . Tato podmínka rovněž vylučuje ji pro použití za určitých okolností . To také znamená , nicméně , že tento produkt jedobrý způsob, jak oddělit vysokou molekulovou hmotností DNA ( velké kusy ), od nízké molekulové hmotnosti DNA ( " degradovaná " malé , nebo rozbité kusy) . Pointa toho všeho je, že je vždy na výzkumné pracovníky , aby určil, jak co nejlépe využít vlastnosti těchto výrobků .
Proč používat magnety pro extrakci DNA ?
Tato nová metoda může dělat věci složitější ( logistické ) , alevětšina studií zahrnujících metodu magnetické těžby i nadále používat fenol jako kontrola a srovnání , ale typicky znázorněno zlepšení v rychlosti a přesnosti prostřednictvím snížení experimentální chyby prostřednictvím automatizace . Dále ,magnetické přístup půjčuje sebe k reverzibilní imobilizaci prostřednictvím toho, aby automatizované prostředky, které mohou zlepšit účinnost výzkumných fondů zvýšením výnosu DNA za běhu .
Coatings
Magnetic korálky přicházejí v různých typů , kde mohou být potažené protilátkami speciálně navrženy pro jeden typ proteinu , nebo mohou být více všeobecných povlaky nebo aminoskupiny, karboxy , nebo jiných vhodných skupin . Jakmilechemický povlak na magnetu je vázán dotčené chemické látky , o korálky vázané chemické látky pak mohou být rychle odstraněn pomocí jednoduchého magnetu .
Záleží na velikosti ?
Velikost ovlivňuje vlastnosti, jako je množství času , které by měly mít možnost pro vazbu , protože plochy , které se zvyšuje v menších kuliček. Další výhodou menší housenky je to, že je lepší , protože suspenze částice jsou v pořádku a lze je snadněji rozptýlené . Micro- velikost kuličky jsou mnohem větší ( někdy až 15000 krát větší ) než jejich nano - velikosti kamarády ( které stály mnohem více ) .
Náklady
nevýhodou tohoto způsobu je to, že existuje značný náklad zapojen do nano - kuličky od 5 ml může běžetvíce než 400 dolarů v obchodech . Micro - velké korálky mohou být podstatně levnější , asi jednu třetinu nákladů , i když to dělá pracovní krok pomaleji .
Centrifugační zkumavky
Magnetické separátory jsou k dispozici, držet odstředivky trubek a umožňují hmotnost oddělení v mnoha plných centrifugační zkumavky najednou . Někteří z nich drží hromadné kapacity až na 24 nebo více centrifugační zkumavky plných materiálů najednou , zatímco jiní jen držet dva najednou . Magnet se obvykle nachází ve verzích více trubek a je buď pod , nebo pod trubkami . Uvedení těchto trubek v odstředivce smysl vzhledem k vysoké hustotě kuliček , které mohou pomoci v procesu magnetické separace . Více informací je k dispozici na webu nebo prostřednictvím místního dodavatele.
