Základní metody průtokové cytometrie

Průtoková cytometrie zahrnuje princip hydrodynamické zaostřování , za použití světelného zdroje , jako je excitační laser , pro měření a analýzu fyzikální vlastnosti jednotlivých částic . Průtoková cytometrie je převážně používat pro analýzu buněk , a vlastnosti jsou analyzovány velikosti buněk , rozlišovací schopnost a intenzitu fluorescence . Základní metody detekce používané v průtokové cytometrie patří dopředu , rozptýlené světlo , boční rozptýleného světla a fluorescenci . Průtokový cytometr

průtokový cytometr je se skládají z Fluidní , optiky a elektroniky systému . Fluidní systém je zodpovědný za transport vzorku proudu do laserového paprsku pro dotazování . Optický systém obsahuje lasery a optické filtry, které osvětlují vzorky a přímé světelné signály na příslušné detektory . Tento zjištěn světlo se přemění na elektronické signály pomocí elektronického systému, výkladu počítače .
Forward - Rozptýlené světlo

odražené světlo rozptýlené v dopředném směru je detekován přibližně 20 ° od osy z laserového paprsku fotodiody volaldopředu rozptýlené kanál ( FSC ) . Forward - rozptýleného světla je přímo úměrná povrchu částic , a používá se jako indikátor velikosti buněk a rozlišovat mezi živých a mrtvých buněk . Díky těmto vlastnostem , FSC je aplikován na imunofenotypizace jako spoušť zpracování signálu .
Side rozptýleného světla

Side - rozptýlené světlo odkazuje na světlo láme na každý mobilní rozhraní , který se měří při přibližně 90 ° od osy laserového paprsku , které side- scatter kanálu ( SSC ) , poté přesměrován na příslušnou detektoru rozdělovačem paprsků . Side - rozptýlené světlo je zhruba ekvivalentní buněk zrnitosti nebo vnitřní složitosti , a slouží k určení granulové obsah buněk . Boční a přední rozptýleného světla se používá v kombinaci se rozlišovat mezi různými typy buněk .
Fluorescenční

fluorescence poskytuje jak kvantitativní a kvalitativní informace o intracelulárních molekul, jako jsou cytokiny a DNA a buněčné povrchové receptory , pomocí fluorochromem štítků a měření při různých vlnových délkách . Každý fluorochromem štítek máspecifickou vlnovou délku , při které je zavolal světla absorbovaného nazývá absorpční spektrum . Fluorescenční funguje jako foton světla je vyzařováno excitovaného elektronu následnou k absorpci světla .