Proč vkládáte rentgenový film na nylonovou membránu v zásobníku?

V souvislosti s technikami molekulární biologie, jako je Southern blotting nebo Northern blotting, nejsou rentgenové filmy typicky umístěny na horní části nylonových membrán v miskách. Místo toho jsou nylonové membrány obsahující elektroforeticky oddělené nukleové kyseliny (DNA nebo RNA) často přeneseny na pevné nosiče, jako jsou papíry Whatman, následované pečením nebo UV síťováním, aby se nukleové kyseliny trvale imobilizovaly na membránách.

Rentgenové filmy se při provádění autoradiografie umísťují vedle těchto nylonových membrán nebo do jejich těsného kontaktu, obvykle odděleně zabaleny v plastovém obalu. Autoradiografie umožňuje detekci a vizualizaci radioaktivně značených nukleových kyselin na membránách umístěním rentgenových filmů vedle nich v kazetách (uzavřené světlo nepropouštějící nosiče, které drží film těsně u membrány).

Když se radioaktivní materiál rozpadá, uvolňuje energii ve formě fotonů nebo elektronů, které interagují s krystaly halogenidu stříbra na rentgenovém filmu. To vede k vytvoření tmavých skvrn nebo pásů na rentgenovém filmu po zpracování, které odpovídají polohám radioaktivně značených nukleových kyselin na membráně.

Proto není rentgenový film umístěn přímo na nylonovou membránu, ale používá se samostatně k zachycení záření emitovaného radioaktivními sondami hybridizovanými s nukleovými kyselinami na membráně.