Genotyping Nástroje
Genetické vědci mají společné úsilí k určení kompletní genetickou sekvenci , 9000000000 základny , který se nachází v lidském genomu . Genom jeobsah DNA nachází v každé lidské buňce se skládá z opakujících se dusíkatých bází označené jako " A ", " G ", " C" a " T. " Genetika výzkum pokračuje se podívat na rozdíly v různých lidských genomů , jakož i různých druhů pro evoluční studie . Lékařské genetické studie se zajímají při hledání genetické abnormality nebo genetické variace , které by mohly způsobit onemocnění . Stanovení genotypu jemetoda pro stanovení genetické variace bez sekvenování celého genomu. Vědci izolovat malé oblastí genomu se podívat na rozdíly velikosti , v důsledku rozdílného počtu dusíkatých bází . Různé základní číslo může být způsobená genetickou abnormalitou , která vede k onemocnění, jako je diabetes , Alzheimerovy choroby a rakoviny . Nástroje používané k provádění genotyping aplikace se vyvíjely a vyvinul se rychle a přesně určit individuální genotyp . Polymerase Chain Reaction
Vývoj genetické technologie pochází z vývoje polymerázové řetězové reakce , nebo PCR . Tato metoda umožňuje výzkumníkům zesílit nebo vytvářet kopie malých oblastí genomu během několika hodin . Oblast zájmu je určena přidáním krátkých molekul DNA --- primerů , které odpovídají na začátek a konec oblasti zájmu .
PCR se stalaneocenitelným pomocníkem v genetickém výzkumu . Zesilující stejné oblasti z různých jedinců poskytuje způsob porovnání . Identifikace Forenzní v současné době používá 15 samostatných oblastí pro srovnání . Jedna oblast může odpovídat různým lidem . Nicméně , žádní dva lidé se musí shodovat všech 15 regionů .
Elektroforézou v agarózovém gelu
PCR jemetoda pro zesilování určitých oblastech DNA . Nicméně, to neposkytuje způsob porovnat skutečné velikosti fragmentů . Produkty PCR jsou odděleny podle velikosti za použití materiálu, jako je gel , s názvem " agarózy . " Menší fragmenty migrují rychleji přes agarózy v reakci na elektrický proud v procesu zvaném " elektroforézou na agarosovém gelu . " Celým
Po PCR fragmenty jsou naloženy na agarózy a migrují podél gelu při použitíelektrického proudu . Ethidium bromid umožňuje fragmenty , které mají být vidět, když pod ultrafialovým světlem . Elektroforézou na agarózovém gelu poskytuje způsob pro rychlé stanovení úspěšné PCR , stejně jako se blíží velikosti fragmentů . Nevýhodou agarózy jako nástroj pro stanovení genotypu je , že fragmenty , musí být co do velikosti v podstatě liší pro přesné výsledky . Agarose neposkytuje dobré médium pro porovnávání různých fragmentů o společné základně .
Automatizované třídiče a genetické analyzátory
Fluorescenčně značené fragmenty DNA zaznamenané pomocí automatického sekvenátoru .
Automatizované sekvencery a genetické analyzátory se stalyhlavním nástrojem používaným v genotypu . Ty umožňují fragmenty , různé jediným dusíkaté báze , které mají být určené rychle a levně . Stejně jako u elektroforézou na agarózovém gelu , DNA fragmenty jsou nejprve amplifikovány pomocí PCR . Nicméně, jeden primer je označen s fluorescenčním barvivem přidáním barvy k fragmentu . Vzorky jsou od sebe odděleny podle velikosti migrací přes gelové polymeru v reakci na elektrický proud . Menší fragmenty pohybovat rychleji než větší fragmenty . Vzhledem k tomu, fragmenty migrují na konci polymeru ,digitální fotoaparát zaznamenává barvu a posílá informace do počítače pro analýzu . Automatizované řazení zařízení je v současné době používá ve forenzní identifikaci a testování otcovství .
Next Generation sekvencery také Určete genotypy
sekvenační nástroje příští generace se rychle objevily v průběhu od roku 2006. This technologie kombinuje PCR amplifikaci a sekvenování společně za účelem zjištění, miliony bází najednou . Proces začíná PCR; Nicméně, různé primery jsou vázány na perličky ve směsi v jedné reakci , který umožňuje tisíce oblastí , které mají být zesíleny najednou . řadiče celým
další generace pak oddělí fragmenty podle velikosti a umožňuje velké množství oblastí DNA , které mají být analyzovány . Tento způsob je nevýhodný jako genotypový nástroje při výzkumníci se zajímají o srovnání jedinou oblast genomu . Výhodou je, žegenom izolován z jediné buňky poskytuje dostatek materiálu pro PCR amplifikaci . Porovnání genotypy normálních a abnormálních buněk izolovaných z jednoho jedince může pomoci identifikovat rakovinné buňky a případné ošetření .
