Jak se měří exprese proteinů

Exprese proteinů opatření může poskytnout indicie o aktivitách genů v těle , protože proteiny fungují jako finální katalyzátor buněčných aktivit . Nicméně, podle článku v otázce " LabMedicine ", patology a biologů z března 2010 se ještě dohodnout na mikroskopii světlého nebo fluorescenční mikroskopie jako nejvhodnější metodou pro měření exprese proteinů . Celý - slide světlém skenování je nejen snadno ovladatelný a poskytuje chromogenu stabilitu , ale také to může chránit skleněné diapozitivy déle . Věci, které budete potřebovat
buněčné tkáně
Slide klipart Biotinylovaný sekundární protilátky klipart Streptavidin - křenovou peroxidázou
3,3 ' Diaminobenzidine
Color Line -scan kamerou
Zobrazit další instrukce dovolená 1

Umístěte buněčné tkáně na sklíčku a přidejte biotinylované sekundární protilátky , následované streptavidin - křenovou peroxidázou a počkejte dvě minuty .
2

Nalijte čtyři kapky 3,3 ' - diaminobenzidinu na vzorku a počkejte dvě minuty, hnědá skvrna šířit zcela na vzorku .
3

Umístěte histologické částimořené vzorku na motorizované platformy v dobře osvětlené místnosti . Pečlivě nastavte barvu čáry , skenování fotoaparát s 20x nebo 40x zvětšení a skenování vzorku. Vyrovnejte pruhy obrazu a kompresi digitální obraz do čitelné velikosti souboru .
4

Vytisknout digitální obraz pro ruční analýzu nebo krmiv obraz do počítačového softwaru pro analýzu technologií podporovaný . Dodržujte vzor skvrn , jak je uvedeno na obrázku . Pečlivě analyzovat expresi proteinů na základě vzorů skvrny na vzorku .
5

Vyhodnotit expresi proteinů na nádorových buněk a stromatu tím, že zkoumá koncentrace bílkovin vyjádřené na buněčné tkáně .

6

Pomocí barevných vzorů pro kvantifikaci exprese proteinu v rozsahu 0 až 3 + . Použijte skóre pro výpočet HER - skóre nebo Allred skóre .