Účel analýzy Protein Expression
Studium proteinů jedůležitý proces v biologii , provedené v obou diagnostických a výzkumných laboratořích v akademickém prostředí a v průmyslu . Diagnostické protein výraz analýza se používá k detekci přítomnosti onemocnění nebo abnormálních fyziologických podmínek . V oblasti výzkumu se používá při výrobě bio - inženýrství proteinů pro další vědecké studie, nebo ve vývoji léčiv . Protein Expression
Exprese proteinů je velmi jednodušeprodukce proteinu z definovanou sekvenci aminokyselin , která je zase určena definovanou genové sekvence . Pochopení těchto sekvencí umožňujevyšetřovatel modifikovat protein v různých způsobem - například tím, že umístěním fluorescenční značku na protein , takže to může být detekován , nebo odstraněním části proteinu , které mohou ovlivňovat jeho výrobu nebo zpracování buňkou .
metody a nástroje pro analýzu exprese proteinů
exprese proteinů se analyzuje pomocí vysoce sofistikované a specializované technologie a postupy , jako je ELISA , imunologické , hmotnostní spektrometrie , a zobrazování . Ve většině případůje protein detekován nepřímo - například tím, že s použitím protilátky , která se váže k němu , a pak s použitím sekundární detekční systém ho představit . Základní technika detekce protein je to Western blotting , během kterého jeprotein protékají agarózovém gelu a poté přenese na membránu . To je pak " zkoumal " tím, žese protilátka váže k ní , aprotilátka se potom nechá reagovat s chemickým roztokem , jako je barvení stříbrem , k vytvoření obrazu umístění proteinu na blotu . To dává informaci o velikosti proteinu , a to, zda je přítomen jako více nebo jednotlivě . Další běžně používanou metodou je fluorescenční detekce . Vazba protilátky označený fluorescenční částice na bílkoviny umožní, aby se zobrazil mikroskopicky .
Účel Analýza exprese proteinů
Studium exprese proteinu dává vyšetřovatel údaj o tom, kde se vyrábí ( tj. jeho výrazu a lokalizace ), nebo jeho množství ( tj , jeho tkáně nebo buněčné úrovni ) . Tato informace se používá v diagnostické patologie v , například ,detekce proteinu v moči pro stanovení , zdapacient má onemocnění ledvin , jako je renální tubulární onemocnění nebo diabetické nefropatie . V genetických laboratořích pokusy klonování genů obvykle generují rekombinantní ( geneticky modifikované ) proteiny . Analýza těchto syntetických molekul je velmi důležité při ověřování genových sekvencí nebo kontrole mutací, které mohou nebo nemusí být žádoucí . Například , vakcíny jsou proteiny produkované uměle modifikované jednotky genů . Tyto proteiny musí být pečlivě sledováno s cílem zajistit , že geny byly změněny ve správném a požadovaným způsobem , aby se zabránilo nežádoucí vedlejší nebo toxické účinky .
Protein Expression Analysis metodou Western blot celým
analýza exprese proteinu pomocí western blotu jevelmi běžně provádí laboratorní postup , aby vědci hodnotit genové klonování a produkci rekombinantních proteinů . Například , v molekulární biologii a genetické inženýrství , geny z různých druhů (např. myš a člověk ), jsou spojeny a umístěny do bakteriální buňky , která je schopna exprimovat protein . Aby se zajistilo, žesprávný protein je generován , musí být jeho exprese analyzovány westernovým přenosem . Western blotting je také použit v lékařské patologie diagnostikovat nemoc šílených krav a HIV .
Protein Expression Analysis pomocí průtokové cytometrie
Průtoková cytometrie vyžaduje buňky se barví fluorescenční protilátky , která se váže na protein exprimovaný na povrchu , nebo uvnitř , buňky . Používá se ve farmaceutickém výzkumu najít molekuly ( cytokiny ) , které jsou specifické pro konkrétní sadu buněk a podílí se na buněčné signalizaci a komunikaci . To je důležité proto , že účinek drog na normální buněčné fyziologie a funkce mohou být monitorovány v průběhu vývoje nových léčiv a klinických studií .
