Jak si vyrobit LB agarové plotny

Agar ježelatinový substance , vyrobené z červené řasy a používají se pro různé účely . Jedním z běžných použití je jako kultivační médium pro bakterie . LB agar je živný agar , který byl v kombinaci s lyzogenie média ( LB ) . To je obyčejně koná klam , že LB je zkratka pro Luria - Bertani . Nicméně , jeho vynálezce , Giuseppe Bertani , uvádí ve svém článku " lyzogenie v polovině dvacátého století : P1 , P2 , a další experimentální systémy , " že iniciály byly vždy určeny pro stát lyzogenie vývar , ne jeho jméno , a že jeho coresearcher , Salvador Luria . LB agar je univerzální a poměrně jednoduché udělat . Věci, které budete potřebovat
na 1 litr hotového média :
Měřítko a hmotnosti papíry nebo zásobníků
1 - L odměrného válce
1 L destilované nebo deionizované vody
2 - L Erlenmeyerovy baňky o objemu
10 g tryptonu
5g výtažek z kvasnic
5g noniodized stolní sůl
15 g agaru
Hliníková fólie
Nepromokavé rukavice bez prstů trouba
autoklávu nebo tlakový hrnec
sterilní Petriho desky
Zobrazit další instrukce
1 použijte Erlenmeyerova baňka , která drží dvakrát objem média , který chcete připravit .

při sterilizaci umístěte trypton , kvasnicový extrakt a sůl do Erlenmeyerovy baňky .
2. Věnujte pozornost tlaku autoklávu nebo tlakového hrnce .

Přidejte destilovanou nebo deionizovanou vodu a pane nebo třepe se do rozpuštění většiny suché přísady .
3

přidat agar a nadále protřepávat nebo promíchávat . Všechny agaru se nerozpouští , ale je důležité, abyste si většina z nich do roztoku . Vyhněte se velké shluky nerozpuštěné agar se usadil v dolní části baňky .
4

utěsněte otevření láhve s fólií .
5

Baňka se umístí v autoklávu - bezpečný kontejner .
6

nalijte asi 1 cm vody do kontejneru .
7

Umístěte nádobu a baňky do autoklávu . Nastavení autokláv pro sterilizaci kapaliny cyklu a po dobu alespoň 20 minut . Pokud používáte tlakový hrnec na sterilizaci , přejděte na krok 8. . V opačném případě přejděte ke kroku 10 .
8

Pokud používáte tlakový hrnec , místo malé množství vody v hrnci a baňka se umístí do vody . Nepokoušejte se sterilizovat více než 250 ml v čase pomocí této metody .
9

Přiveďte tlakový hrnec o 20 kPa a sterilizovat asi 30 minut .
10

baňka se vyjme z autoklávu nebo tlakovém hrnci , starat jakobaňka bude docela horko .
11.

baňka krouživým pohybem jemně po sterilizaci je dokončena . To bude distribuovat agaru více rovnoměrně po celou dobu vašeho řešení .
12

Baňka Dejte na vhodnou plochu a nechte ho vychladnout trochu . Pokud jste připraven 1 L nebo větší média , aby to jemný vír každých 10 až 20 minut. Budete mít možnost říct, žemédium dostatečně ochladí , když můžete držet zadní prsty proti baňky na cca 2 sekundy , aniž by bylo nepříjemně horký na dotek . Před pokusem o to počkat asi 15 až 20 minut.
13

Umístěte Petriho misky na rovném povrchu . Opatrně zvedněte víko pod úhlem , takže většina z misky vlevo krytá . Nezvedejte víko přímo z talíře .
14

Pour médium z baňky do Petriho misky , dokudpokrm je asi z poloviny plná .
15

ihned vyměňte víko , přesuňte talíř stranou a přejít nadalší , dokud nebudou vyplněny všechny požadované desky . Desky se dokončit jejich tuhnutí asi za 30 minut.
16

Umístěte Petriho misky ve sterilním sáčku, ve kterém přijeli , nebo jiný vhodný sterilní nádoby , pokud nejsou jejich inokulací hned . Uzavřete nádobu na uchování vlhkosti . Označte desky pokud je to žádoucí . Pokud ukládáte desky , měly by být uchovávány při teplotě asi 39-40 ° F.