Protilátek značení pro
postupy značení protilátek techniky používané v biologických vědách na přítomnost specifických molekul . Tyto postupy využívají vztahu mezi antigenem a protilátkou . Antigeny mohou být jakákoliv molekula , že imunitní systém rozpozná . Protilátka jeY ve tvaru protein, který specificky rozpoznává jeden antigen . Biologové používají vazebné vztahy mezi protilátkou a antigenem k určení umístění určitého molekuly ve vzorku . ELISAELISA , nebo enzyme-linked immunosorbent assay , jebiologický laboratorní technika používaná k detekci přítomnosti antigenu nebo protilátky . To je často používáno v lékařské diagnostice k určení, zdapacient byl vystaven na určitý typ infekce . Celým
provedení ELISA ,vzorek — obsahující antigen, — je ukotven k pevná podpora v misce . Roztok s doplňkovým protilátky se přidá do misky , aprotilátka se váže na antigen . Přebytek protilátky se pak promyje pryč , takže jen páry antigen-protilátka váže na misky . Ty mohou být vizualizovány přidáním fluorescenční molekula , která se váže na protilátku a vydává vizuální signál, který pak může být kvantifikována . Tímto způsobem ,přítomnost a množství antigenu zájmu lze nepřímo určit .
Western Blot
Western blot jejiný druh techniky slouží k detekci specifický protein ve vzorku, a určit jeho velikost . Za prvé , vzorek proteiny jsou rozmístěny podle velikosti na gelu s použitím gelové elektroforézy . V tomto bodě , proteiny nejsou viditelné pouhým okem . Vědci pak přenést proteiny na membránu a přidá se roztok obsahující protilátky proti antigenu . Po vymytí přebytečný roztok ,protilátka se váže na antigen na membráně . Celým
Přidání sekundární protilátky způsobípůvodní, nebo primární protilátky vyzařovat světlo . Kvantifikace množství světla emitovaného umožňuje výzkumníkům určit přítomnost antigenu , jeho velikost ve srovnání s jinými proteiny a jeho relativní koncentraci .
Imunohistochemie
imunohistochemie jetechnika, která umožňuje vizualizovat výzkumníci umístění proteinu ve vzorku tkáně . Malé plátky vzorku se připraví aprimární protilátka , která se váže k antigenu , se přidá . Přebytek roztok se promyje dřív, než vědci přidat sekundární protilátku . Tato protilátka se váže na pár primární protilátka - antigen a vyzařuje světlo , signalizující umístění antigenem . Celým
Vědci pomocí mikroskopu pro vizualizaci , kdeantigen je v buňce . Více různých protilátek , z nichž každý specifické pro konkrétní protein , může být použita k určení relativní umístění několika molekul v buňce . Pokud je tocíl , různé barevné sekundární protilátky se používají k rozlišení mezi různými molekulami zájmu .
Průtokové cytometrie
fluorescence - activated cell třídění — nebo FACS — jetyp průtokové cytometrie použít pro separaci různých typů buněk v roztoku . Každý jiný typ buněk je " označen " s protilátkou specifickou pro daný typ buněk. Každá z těchto protilátek vyzařuje jinou barvu světla . Stroj agituje řešení rozdělit do jednotlivých kapiček a používá senzor pro detekci barvu každé kapky . Stroj seřadí buňky emitované barvy , a rozdělit je na základě typu bílkoviny , které obsahují . Metodiky FACS umožňuje výzkumníkům třídit a kvantifikovat buňky zájmu svých výzkumných otázek .
Immuno - elektronová mikroskopie
Normální elektronová mikroskopie umožňuje vědcům zkoumat strukturu buňky zvětšit až na 1 milion krát . Immuno - elektronová mikroskopie využívá vlastností protilátky vázající antigen se zobrazí jednotlivé proteiny ve velmi tenkých řezech tkání . Za prvé , protilátky s připojenými zlaté částice se mohou vázat k antigenu . Elektronový mikroskop pak zobrazuje zlaté částice , což vědcům obraz , kde jeprotein lokalizován v buňce .
Ačkoli imuno - elektronová mikroskopie je jednoduché v teorii , je technicky obtížné a velmi nákladné zaměstnat , omezení jeho popularita použití v mnoha biologických výzkumných programů .