Jak do srovnání DNA gelovou elektroforézou metody
Gelová elektroforéza jestandardní technika oddělování DNA , RNA nebo proteinu prostřednictvím gelu za použití elektrického proudu . Používá se elektrický náboj molekul od sebe oddělit v gelu pomocí elektrického proudu . Agarózy
agarózovém gelu jenejběžnější metoda pro vizualizaci DNA . Různá procenta agarózy mohou být použity v závislosti na velikosti DNA , které mají být vizualizován . Nízké procento agarózy , jako je například 0,7 procenta , má rozlišení pro vizualizaci velkých fragmentů DNA . Vyšší procento , jako je 2 procenta , se často používá k vizualizaci malých fragmentů DNA . Pro vizualizaci DNA , ethidium bromid je často používán , protože se vsune DNA a fluoreskuje v UV světle .
Polyakrylamidové
polyakrylamidové gely se používají k oddělení DNA fragmentů jako malé , jak 10 párů bází do 1 KB Tyto gely mají malý dělicí rozsah , ale s vysokým rozlišením . Jsou však také složitější na přípravu. Je také možné nahrát velké množství DNA bez vlivu na rozlišení . Stejně jako u agarózy , ethidium bromid je často používán k vizualizaci fragmentů DNA , ale v polyakrylamidovém může uhasit fluorescence , takže je obtížné si představit malé množství DNA .
Pulse -Field
celým
Tato forma elektroforézy se používá k oddělení velkých DNA molekul, které se často používá pro stanovení genotypu . Velké DNA fragmenty migrují ve stejné míře . To může být obtížné , a proto , vyřešit různé kapely . Pulse pole elektroforéza střídá elektrické pole . To umožňuje větší oddělení a rozlišení DNA .
Kapilární
Kapilární elektroforéza jerychlá a citlivá metoda pro separaci DNA . Malé množství DNA může být vyřešen . DNA může být vizualizovány pomocí fluorescenční značení , nebo pomocí UV záření .
Denaturace
separace DNA může být komplikované svou strukturou . To je možné pomocí močoviny a formamidu zničit strukturu tím, že sníží teplotu tání DNA . Toto může být použito jak v agarózovém a polyakrylamidovém gelu .
Úvahy
metodou elektroforézy vybrán bude záviset na velikosti DNA fragmentů , které mají být odděleny . JakDNA bude použita po oddělení bude také určovat finální metodu .
