Co jekonfokální mikroskop použit pro ?

Běžná světelná mikroskopie nelze pozorovat trojrozměrné tkáně , aniž by fyzicky krájení vzorku . Konfokální rastrovací mikroskopie , nicméně , jealternativní pozorovací metoda , která poskytuje přímější způsob, jak vidět trojrozměrné architekturu celku , unsectioned vzorek . Elektronické zobrazovací metody umožňujíuživateli soustředit se na dané rovině v hustém vzoru , zatímco odmítnutí světlo, které přichází shora a pod rovinou zaostření . Proč je konfokální mikroskopie ?

Konfokální skenovací mikroskopie využívají výzkumní pracovníci v biologické vědy a průmyslu k získání obrazu o trojrozměrné struktuře vzorku , jako je například buňky nebo tkáně . Dále ,postup se používá k pozorování mikroskopickou strukturu vzorku , která z nějakého důvodu není možné plátky do sekcí předem . I přesto, že tyto problémy mohou být splněny pomocí komplexní program pro zpracování obrazu počítačové bázi , tato metoda je velmi pomalá a vyžaduje velké množství výpočetní výkon .
Konfokální mikroskopie vs Standardní Light Microscopy

Pokudtlustý vzorek je viděn s běžným světelným mikroskopem ,obraz získaný zaměřením na konkrétní rovině se zhoršuje rozmazání , out-of -focus hodnot , které pocházejí z částí vzorku leží nad a pod rovina zaostření . Pro běžné světelné mikroskopie dobře fungovat , musí býtvzorek nakrájené na tenké úseků, které mají být analyzovány , a tloušťka sekce je nepřímo úměrná jasnosti obrazu. Nicméně , možná cenné informace o třetí dimenzi je ztracen, když jevzorek v řezu , a jak již bylo uvedeno , některé vzorky nemohou být jednoduše dělené vůbec .
Jak to funguje

konfokální skenovací mikroskop se zaměřuje na konkrétní letadlo v husté vzorku , zatímco odmítnutí světlo, které pochází z out-of -focus oblastech nad a pod touto rovinou . To má za následek čisté " optické části , " a ze sekvence těchto částí odebraných v různých hloubkách , můžepočítačový program rekonstrukci trojrozměrného obrazu . Tato strategie je velmi podobné tomu, coCAT skener dělá pro radiology zkoumajících celé lidské tělo , jak obě metody současné čisté řezy interiéru intaktní STRUKTURY
Jak to funguje : . Podrobnosti

zařízení se obvykle používá s fluorescenční optiky , a v každém okamžiku optický systém stroje zaměřuje svou pozornost na jediný bod v určité hloubce ve vzorku . Je třebavelmi jasně zdrojem dokonalou osvětlení , a to je obvykle poskytována laserem , jehož světlo prochází skrz dírky . Detektor vybaven dírky otvorem shromažďuje fluorescence emitované z osvětleného vzorku . Jensvětlo z konkrétního zaostřovacího pole vstoupí do detektoru , a vylučuje zařízení světlo přicházející z oblastí mimo rovinu ostrosti.
Konkrétní použití

konfokální skenovací mikroskop se často používá k vyřešení struktury různých složitých trojrozměrných objektů , jako jsou sítě cytoskeletu vláken v cytoplazmě buněk , a uspořádání chromozómů a genů v jádře dané buňky během různých místech buněčného cyklu . Pylová zrna , například , mají komplexní vytvarovaný buněčnou stěnu , která může být vidět pouze jasně pomocí konfokální mikroskopie . Elektronický průmysl také používá tento stroj a metodiku nahlížet do polovodiče .