Protokol pro DAPI barviva

DAPI je zkratka pro chemické 4' - 6 - diamidino -2 - fenylindolem , a používá se na skvrnu dvouvláknové DNA . Sloučenina tvoří modré fluorescenční komplexy s jádrech buněk , a proto se běžně používá pro zvýraznění struktury buněk . Typ a hustota barvení může také identifikovat mrtvé nebo umírající buňky . Příprava DAPI řešení

roztok DAPI nejprve musí být naředěny na pracovní roztok . Například , 10 mg produktu Invitrogen DAPI , musí být smíchán s 2 ml deionizované vody , a pak se dále zředí na 300 nano - molární koncentrace ( směry bude na výrobku) s fosfátovým pufrem (PBS ) .

Příprava vzorku

Fix vzorek jako odpovídající typu testovaného vzorku na sklíčko . Přidat 300 ul pracovního roztoku DAPI na vzorek a inkubuje se po dobu jednoho až pět minut. Opláchněte snímek s PBS .
Analýza

Pomocí fluorescenčního mikroskopu se podívat na vzorku slide - montáž . V DAPI - obarvené jádra mohou být označeny modrou fluorescenci .