Alkalické lýzy Theory

Vědci používají alkalické lýzy pro extrakci plasmidové DNA z bakterií pro použití v genetických experimentech . Plazmidy jsou malé kruhové molekuly DNA , které obsahují malý kousek genetického kódu pro studium . Proč alkalické lýzy

lýze protokol alkalické se skládá z řady řešení přidány do pelet , obsahující bakteriální plasmidové DNA . Zvýšená alkalita roztoku způsobí buňky k prasknutí . Tento způsob extrakce chrání plazmidové DNA a ničení genomické DNA a denaturaci buněčných bílkovin pro poskytování vědec s relativně čistým vzorkem .
SDS a NaOH

Alkaline popisuje dva hlavní chemické látky používané způsobit lýzy jednotlivých buněk . Sodium dodecyl ( lauryl ) sulfát ( SDS ) jedetergent , který destabilizuje buňky vytvořením otvorů v buněčné membráně . Hydroxid sodný ( NaOH ), přidává se poškodí buněčnou stěnu působit buňky rozpadat a uvolňovat jeho genetického materiálu do roztoku .
Proč plasmid DNA Přežije

další vlastnost hydroxidu sodného v alkalické lýzy protokolu je narušit vodíkové vazby mezi DNA párů bází . Tento denaturuje genomické DNA a plasmidové DNA do jednotlivých vláken. Přídavek octanu draselného k roztoku neutralizuje alkality amalý plasmid DNA je schopen znovu přírodu a rozpustí se v roztoku . Genomová DNA je příliš velký, aby se re- nature celé své délce . To a denaturované bílkoviny vysrážet při odstřeďování opuštění plazmidové DNA v roztoku .