Principy průtokové cytometrie
Flow cytometrie kombinuje buněčné biologie se studiem světelných vln . Kdyžpaprsek světla se odrazil na částice ,světlo rozptyluje ve dvou směrech . Úhly z rozptýleného světla se měří , a metriky vytvořit obraz objektů mezi 0.5um do 40um v průměru . Průtoková cytometrie metriky se používají k měření několika vlastností biologických buněk , včetně velikosti, zrnitosti , buněčné receptory , a dokonce i biologické aktivity , jako je například DNA a RNA replikace a syntézy . Process
Průtoková cytometrie techniky začít tím, že biopsie buněk a jejich předávání jeden po druhém pomocí paprsku světla v cytometru . Jak buňky projdou paprskem , jsou přijata světlo rozptyluje a měření žáruvzdorných úhlů . To se provádí ve spojení s fluorescenčním mikroskopem , který se používá k vyhodnocení složek buňky prostřednictvím světelných emisí fluorescenčních barviv .
Flow komora
Účelem průtočná komora je působit jako trychtýř , aby zajistily, že buňky jsou dodávány do paprsku světla v jednom řádku souboru . Nálevka se naplní kapalinou s pláštěm , a je tlačen přes nálevku s suspendovaných buněk. Šířka trychtýř je typicky 10 mikrometrů , akapalina je tlačena do sběrné čočky , který se používá k rozptylují světlo .
Zdroj světla
I většina laboratoří používají laser , další světelné zdroje zahrnují obloukovou lampu nebo LED . Oblouková lampa není schopen detekovat slabší fluorescence , ale může být použit s technologií, která využívá silné fluorescenční zářiče , jako je například analýza DNA . V první řadě ,světelný zdroj jeargon laser, který emituje modré světlo 488 nm .
Imunologie
Flow cytometrie se používá k měření řadu podmínek, v imunologii a infekcí . Průtoková cytometrie se používá v diagnostice HIV jak dědičných a získaných forem . To je také používáno k měření hladiny bílých krvinek, proliferace v případě lymfomů a karcinomů . Kromě toho , imunologie používá průtokové cytometrie pro měření výsledků u pacientů po transplantaci kostní dřeně .
DNA Analysis
Průtoková cytometrie se používá k měření množství DNA v jádře cell . Měřením DNA ,konkrétní fáze buněčného cyklu, mohou být identifikovány . Průtoková cytometrie může také detekovat abnormální počet chromozomů k identifikaci genetických onemocnění . Analýza DNA se průtokové cytometrie se také používá k detekci Barrettův jícen .
