Jak se množství trávení BAPNA mění s časem?

Štěpení BAPNA (benzoyl-DL-arginin-p-nitroanilid) trypsinem se řídí typickou kinetikou enzymu Michaelis-Menten. Rychlost trávení se zpočátku zvyšuje s časem, jak se do reakce zapojí více molekul enzymu. Jak však koncentrace substrátu v průběhu času klesá, rychlost trávení se zpomaluje. Vztah mezi množstvím strávené BAPNA a časem lze popsat následující rovnicí:

[BAPNA]t =[BAPNA]0 - k[E][BAPNA]0*t

Kde:

- [BAPNA]t:Množství BAPNA štěpené v čase t

- [BAPNA]0:Počáteční koncentrace BAPNA

- k:Rychlostní konstanta pro reakci

- [E]:Koncentrace trypsinu

- t:Čas

Graf [BAPNA]t versus t typicky ukazuje hyperbolickou křivku. Počáteční lineární fáze křivky představuje období, kdy je reakční rychlost konstantní a úměrná koncentraci enzymu. Jak reakce postupuje, křivka se vyrovnává v důsledku vyčerpání substrátu a klesající rychlosti trávení.

Změřením počáteční rychlosti (Vo) reakce a určením Michaelis-Mentenovy konstanty (Km) pomocí grafické analýzy (např. účinnost a substrátová afinita trypsinu k BAPNA.