Koimunoprecipitačními Protocol

Co - imunoprecipitace protokol ( Co - IP) je široce používaný postup pro analýzu interakce proteinu . Tento postup se obvykle skládá ze tří kroků . Protilátka je představen na buněčném lyzátu ,komplex protilátka - protein je chemicky vázán , aprotein je identifikován pomocí analýzy . Koimunoprecipitačními Shrnutí

Co - IP se skládá z řady kroků, aby bylo zajištěno přesné výsledky testů . První krok vyžaduje protilátky specifické pro protein , které se doplňují . Ve druhém kroku , protein - G nebo protein -A sepharose lze vázat na komplex protilátka -protein . Nakonec , sekvenování čištěný protein kapelu , nebo Western blot analýzy , slouží k identifikaci koprecipitovány protein .
Obecné kroky

protokol může být rozdělena do tři obecné kroky v období mechaniky procesu . Prvním krokem je pracovní tok k dokončení postupu v nejméně množství času . Druhým krokem je obecné úvahy k postupu . Posledním krokem je řešení problémů .
Specifické kroky

pracovní tok začíná s přípravou na kulturu na savý analýzu a na závěr stanovení přítomnosti některého bílkoviny . Obecné úvahy se skládají z klíčových kroků , jako předčištění , výběr nárazníky a výběr Protein A nebo Protein G pryskyřice . Řešení problémů se zabývá otázkami, jako žádná detekce bílkovin , vazba protilátek na proteiny , fragmenty protilátek a možností neúspěšném Co - IP .