Proč by mělo být míchání E Coli s toluenem prováděno šetrně?
Narušení buněčné membrány: Toluen může rozpouštět lipidy, které tvoří buněčnou membránu, což vede k úniku obsahu buněk a ztrátě životaschopnosti buněk. Intenzivní míchání může zvýšit kontakt mezi toluenem a buňkami, což má za následek rozsáhlejší poškození buněčné membrány.
Smykové síly: Intenzivní míchání může vytvářet smykové síly, které fyzicky poškozují buňky. Tyto síly mohou způsobit rozpad buněk nebo jejich prasknutí, což vede k buněčné smrti. Jemné míchání pomáhá minimalizovat tyto smykové síly a chrání buňky před mechanickým poškozením.
Ztráta plasmidů: Mnoho kmenů E. coli používaných v laboratorních experimentech nese plazmidy, což jsou malé kruhové molekuly DNA. Plazmidy mohou obsahovat geny zájmu nebo markery antibiotické rezistence. Intenzivní míchání může způsobit, že se plazmidy roztrhnou nebo ztratí z buněk. Jemné míchání pomáhá zachovat plazmidy a udržuje požadované genetické vlastnosti kmene E. coli.
Snížená účinnost transformace: Při práci s geneticky modifikovanými kmeny E. coli je často nutné zavést do buněk novou DNA procesem zvaným transformace. Intenzivní míchání během transformace může snížit účinnost příjmu DNA buňkami a snížit počet úspěšně transformovaných kolonií. Jemné míchání zvyšuje šance na úspěšnou transformaci.
Vylepšená životaschopnost buněk: Jemné míchání pomáhá udržovat celkovou životaschopnost a integritu buněk E. coli. Životaschopné buňky jsou nezbytné pro různé následné aplikace, jako je exprese proteinů, analýza DNA a funkční studie.
Proto je šetrné smíchání E. coli s toluenem klíčové pro minimalizaci poškození buněk, zachování životaschopnosti buněk a zajištění úspěchu následných experimentů.
